黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒說明書 黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒 
一、黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒產品描述 黃嘌呤氧化酶（XOD）是生物體內核酸代謝過程中的關鍵氧化還原酶類，可以利用分子氧作為電
子受體或亞甲基藍、苯醌、高鐵氰化物和硝酸鹽等人工電子受體催化氧化黃嘌呤、蝶呤和醛類等多種
雜環化合物，并伴隨產生過氧化氫和超氧自由基等活性氧，具有重要的生理和病理功能，在高尿酸血
癥的診斷、活性氧生理作用和氧化應激損傷等研究領域具有重要作用。
黃嘌呤氧化酶能夠催化黃嘌呤產生尿酸，產物在 290 nm 處具有特征吸收峰，通過吸光值變化即
可表征黃嘌呤氧化酶的活性。
二、黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒產品內容圖示 
三、黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒產品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑：紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿（光徑 10 mm）/96
孔 UV 板、研缽/勻漿器、可調式移液器/多道移液器、臺式離心機、恒溫水浴/培養箱和蒸餾水。 ①組織：按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g 組織，加
入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 8000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。 ②細菌或細胞：離心收集細菌或細胞至離心管內，按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 20%或 200 W，超聲 3 s，間隔 10 s，重復 30 次），4℃ 8000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。 ③血清（漿）、培養液等液體樣本：直接檢測或適當稀釋后再進行檢測。
黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒測定步驟： ①分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上，調節波長至 290 nm，蒸餾水調零。 ②根據使用量取出適量 XOD 工作液 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）預熱 20 min 以上。 ③在微量石英比色皿/96 孔 UV 板中依次加入下列試劑： 吸光值測定：①立即混勻并開始計時，測定 290 nm 處初始吸光值，記為 A1 測定和 A1 空白；②
測定 60 s 時 290 nm 處吸光值，記為 A2 測定和 A2 空白；③計算?A 測定=A2 測定-A1 測定，?A 空
白=A2 空白-A1 空白，?A=?A 測定-?A 空白。注：空白組只需測定 1-2 次。
黃嘌呤氧化酶（XOD）活性計算圖示 
黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒使用 96 孔 UV 板進行測定的計算公式圖示： 
注釋：V 反總：反應體系總體積，2.1×10-4 L；ε：尿酸摩爾消光系數，1.22×104 L/mol/cm；d1：微
量石英比色皿光徑，1 cm；d2：96 孔 UV 板光徑，0.5 cm；V 樣：反應體系中加入粗酶液的體積，0.01
mL；V 樣總：粗酶液總體積，1 mL；T：反應時間，1 min；W：樣本質量，g；Cpr：樣本蛋白質濃
度，mg/mL；細胞或細菌總數，以萬計。
四、黃嘌呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒注意事項 ①若 ΔA 測定大于 0.5 或 A1 測定大于 1.0 時，建議將粗酶液適當稀釋后再進行測定，計算時相
應修改；
②若使用 96 孔 UV 板進行檢測時應使用多道移液器且分批進行，以確保組間反應時間一致；
③為保證結果準確且避免試劑損失，測定前請仔細閱讀說明書（以實際收到說明書內容為準）。
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